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功能基因組學(xué)研究平臺(tái)介紹
2019.09.29
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一. 全基因庫篩選/功能基因組學(xué):
1. CRISPR/cas9文庫簡(jiǎn)介
???????? 2013年以來,CRISPR/cas9技術(shù)憑借著成本低廉,操作方便,效率高等優(yōu)點(diǎn),,CRISPR/cas9技術(shù)迅速風(fēng)靡全球得實(shí)驗(yàn)室,成為了生物科研得有力幫手,是繼“鋅指核酸內(nèi)切酶(ZFN)”、“類轉(zhuǎn)錄激活因子效應(yīng)物核酸酶(TALEN)”之后出現(xiàn)得第三代“基因組定點(diǎn)編輯技術(shù)”。
??????? CRISPR/cas9系統(tǒng)最初在大腸桿菌基因組中被發(fā)現(xiàn),是細(xì)菌中抵抗外援病毒得免疫系統(tǒng)。CRISPR/cas9系統(tǒng)由兩部分組成,一部分是用來識(shí)別靶基因組得,長(zhǎng)度為20bp左右得sgRNA序列,另外一部分是存在于CRISPR位點(diǎn)附近得雙鏈DNA核酸酶-Cas9,能在sgRNA得引導(dǎo)下對(duì)靶基因進(jìn)行切割,最終通過細(xì)胞內(nèi)得非同源性末端連接機(jī)制(NHEJ)和同源重組修復(fù)機(jī)制(HDR)對(duì)形成斷裂的DNA進(jìn)行修復(fù),從而形成基因的敲除和插入,最終實(shí)現(xiàn)基因的(定向)編輯。
?????? 與前兩代技術(shù)相比,CRISPR-Cas9技術(shù)最大的突破是不僅可以對(duì)單個(gè)基因進(jìn)行編輯,更重要的是可以同時(shí)對(duì)多個(gè)基因進(jìn)行編輯,這也為全基因組篩選提供了有效的方法。
????? 2. CRISPR/cas9文庫種類
???? 1).CRISPR/cas9敲除文庫:

?1.png

???? 2).CRISPR/cas9激活文庫:

2.png

???? 3).人源lncRNA 激活庫:

3.png

???? 4.定制CRISPR/cas9文庫
??? 靶位點(diǎn)確認(rèn)及sgRNA文庫設(shè)計(jì);
??? sgRNA文庫芯片合成;
??? sgRNA文庫構(gòu)建;
??? QC驗(yàn)證文庫質(zhì)量

?? 更多資訊關(guān)注輝園苑官方網(wǎng)站:http://www.www.js-lanjian.com/


功能基因組學(xué)研究平臺(tái).pdf


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