???? 染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)(Chromatin immunoprecipitation assay, ChIP):是一種研究體內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子與基因組DNA之間互作結(jié)合的方法。基本原理是活細(xì)胞狀態(tài)下,通過多聚甲醛固定,形成蛋白-DNA復(fù)合物,運(yùn)用超聲(或酶解)方法對染色體隨機(jī)剪切至一定長度范圍,通過免疫共沉淀富集結(jié)合,純化獲取轉(zhuǎn)錄因子蛋白所結(jié)合的啟動子區(qū)域片段,后續(xù)產(chǎn)物可用于Q-PCR檢測驗(yàn)證或測序分析。
技術(shù)原理:
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技術(shù)服務(wù)流程:
1.細(xì)胞交聯(lián)固定:多聚甲醛固定活細(xì)胞(或組織)
2.核質(zhì)分離:提取細(xì)胞核,獲取染色質(zhì)
3.超聲破碎:超聲斷裂染色質(zhì),獲取一定范圍長度的片段
4.免疫共沉淀:獲取DNA與蛋白結(jié)合的特定復(fù)合物
5.解交聯(lián):解除DNA與蛋白的交聯(lián)狀態(tài),純化獲取DNA產(chǎn)物
6.Q-PCR檢測或建庫測序
服務(wù)優(yōu)勢:
1.生物信息學(xué)方法,預(yù)測轉(zhuǎn)錄因子蛋白結(jié)合的啟動子基因,以及預(yù)測結(jié)合的特定motif,為客戶提供多選擇信息
2.直接尋找轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合的編碼區(qū)上游靶基因,精準(zhǔn)定位調(diào)控基因
3.設(shè)置完整組別,包括Input組,陽性組,對照組,陰性組,實(shí)驗(yàn)更加嚴(yán)謹(jǐn)可靠
4.提供可直接用于文章的標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果圖,以及實(shí)驗(yàn)原圖結(jié)果
5.提供完善的實(shí)驗(yàn)報告,更利于文章的撰寫和申請
適用研究:
1.適用于人,大鼠,小鼠等哺乳動物細(xì)胞的研究,探討與驗(yàn)證體內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子蛋白調(diào)控啟動子的關(guān)系
2.適用于臨床各種組織樣品的探討研究,例:癌組織與癌旁組織,通過ChIP實(shí)驗(yàn)獲取得到的樣品產(chǎn)物DNA,建庫測序獲取調(diào)控的啟動子基因
客戶提供:
1.IP或ChIP級抗體,抗體量>20ug
2.活細(xì)胞:1-2*10^7
3.新鮮組織:組織量>0.1-0.3g
4.驗(yàn)證基因信息
輝園苑提供:
1.WB檢測抗體效價與特異性結(jié)果圖
2.染色體斷裂圖
3.完整實(shí)驗(yàn)報告
4.可直接用于文章使用的處理結(jié)果圖