1、實驗原理（細胞凋亡檢測的方法很多，我們采用的哪種？Annexin V/PI雙染法嗎）

? ? ?細胞凋亡(Cell apoptosis)是指為維持內環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細胞自主的有序的死亡，亦稱為程序性細胞死亡。細胞凋亡與細胞壞死不同，細胞凋亡不是一件被動的過程，而是主動過程，它涉及一系列基因的激活、表達以及調控等的作用，它并不是病理條件下的損傷，而是為更好地適應生存環(huán)境而主動爭取的一種死亡過程。

? ? ?Annexin V(或 Annexin A5)為胞內蛋白膜聯(lián)蛋白家族成員，以鈣依賴的方式與磷脂酰絲氨酸(PS)結合。PS存在于正常細胞漿膜的內層，但在凋亡早期，膜不對稱性喪失，PS 易位至細胞表面。熒光標記的 Annexin V可與之特異性結合，表明該細胞為凋亡細胞。

機械損傷（Q1）：細胞膜破損嚴重，Annexin V-APC染不上。

晚期凋亡（Q2）：細胞膜已經受損，7-AAD（ECD-A）與Annexin V-APC染料可以進入細胞內與DNA結合，不可逆轉。

早期凋亡（Q3）：細胞只有磷脂酰絲氨酸PS外翻，細胞膜完整，對7-AAD（ECD-A）拒染，可逆轉

活細胞（Q4）：對Annexin V-APC和7-AAD（ECD-A）都拒染

2、技術應用

? ? ?檢測藥物、基因或蛋白等對細胞凋亡的影響。

3、實驗步驟

? ? ?1.細胞培養(yǎng)及種板；2.收集細胞及計數；3.孵育染料；4.流式細胞儀檢測；5. Flowjo分析結果

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4、實驗步驟

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客戶提供：細胞株（凍存株或培養(yǎng)細胞）及處理用的藥物，細胞培養(yǎng)基信息，細胞特殊處理方式

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